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    ELISA法測定肺炎衣原體實驗步驟

    發布時間: 2014/10/21  點擊次數: 831次
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    ELISA試劑盒實驗中所需要用到的試劑:

    1、濃縮酶聯物; 5、弱陽性對照;
    2、標本稀釋液; 6、預包被微孔板;
    3、終止液; 7、底物A、B;
    4、陽性對照; 8、陰性對照。

    ELISA試劑盒實驗檢驗過程:
    1、配制洗滌液 l瓶濃縮洗滌液加475ml蒸餾水。配好的洗滌液短期內可置室溫環境中,長期可存于2—8℃環境中。
    2、配制酶聯物 按1:101倍稀釋,即取1u1濃縮酶聯物加酶聯物稀釋液1 000ul(根據檢測標本數量確定稀釋量),未用完的丟棄。
    3、待試劑盒平衡至室溫后,待測標本按1;51稀釋,即取4tA血清與200u1標本稀釋液混合。
    4、將稀釋標本置37℃環境中20min。
    5、各加100ul陽性、弱陽性、陰性對照及已稀釋待測標本上清液于相應孔中,空白對照孔加100u1標本稀釋液,蓋好反應板,置37℃環境中30min。
    6、甩盡板中液體,每孔用200~300ul洗滌液洗5次,每次均需拍干。
    7、每孔加酶聯物100~1,蓋好反應板,置37℃環境中30min。
    8、甩盡板中液體,洗5次,每次拍干。
    9、加底物A、B各1滴或各50tzl,混勻,置37℃環境中15min。
    10、取出,加終止液1滴,用酶標儀450nm測其OD值。若肉眼觀察則不加終止液,直接判斷結果。
    實驗過后,我們要做一個結果判斷:
    1、陰性對照平均OD值須小于0.20。
    2、弱陽性對照平均OD值須在0.20—0.65。
    3、弱陽性對照與陰性對照的平均OD值之比須≥2。符合以上3個條件時,本試驗結果可信,否則重復實驗。
    4、若待測標本孔顯色比弱陽性對照孔深則判為陽性,反之為陰性。但在弱陽性對照值上下10%范圍內再測1次,如確實高于弱陽性對照則可判為陽性。

    E-(Hu)(03)-06688 人T淋巴細胞白血病病毒Ⅰ/II(HTLV-Ⅰ/II)抗體elisa試劑盒 ,英文名: HTLV-Ⅰ/II antibody ELISA kit ,規格: 48T/96T
    E-(Hu)(03)-06689 人T細胞表面糖蛋白CD1a(CD1A)elisa試劑盒 ,英文名: CD1A ELISA Kit ,規格: 48T/96T
    E-(Hu)(03)-06690 人U1小核核糖核蛋白A(SNRPA)elisa試劑盒 ,英文名: SNRPA ELISA kit ,規格: 48T/96T
    E-(Hu)(03)-06691 人UV切除修復蛋白RAD23同源物A(RAD23A)elisa試劑盒 ,英文名: RAD23A ELISA kit ,規格: 48T/96T
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    E-(Hu)(03)-06693 人v-rel禽網狀內皮細胞過多癥病毒癌基因同源物B(RelB)elisa試劑盒 ,英文名: RelB ELISA Kit ,規格: 48T/96T
    E-(Hu)(03)-06694 人Wnt-3a蛋白(WNT3A)elisa試劑盒 ,英文名: WNT3A ELISA Kit ,規格: 48T/96T
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    E-(Hu)(03)-06696 人α/β干擾素受體(IFN-α/βR)elisa試劑盒 ,英文名: Interferon α/βReceptor,IFN-α/βR ELISA Kit ,規格: 48T/96T
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