丝袜美腿诱惑之亚洲综合网,亚洲综合日韩精品一区二区,97在线视频对对碰视频,日韩精品 中文字幕第一

您好,歡迎進入研域(上海)化學試劑有限公司網站!
一鍵分享網站到:
  • 技術文章ARTICLE

    您當前的位置:首頁 > 技術文章 > ELISA試劑盒定性檢測

    ELISA試劑盒定性檢測

    發布時間: 2014-07-01  點擊次數: 2305次

    ELISA試劑盒的結果判定分為定性和定量兩種 ,在間接法和夾心法ELSIA中,陽性孔呈色深于陰性孔。在競爭法ELISA中則相反,陰性孔呈色深于陽性孔。那么兩類結果如何判斷呢?南京森貝伽生物技術為您解析: 
    (1)間接法和夾心法
    這類反應的定性結果可以用肉眼判斷。目視標本也無色或近于無色者判為陰性,顯色清晰者為陽性。但在ELSIA中,正常人血清反應后??沙霈F呈色的本底,此本底的深淺因試劑的組成和實驗的條件不同而異,因此實驗中必須加測陰性對照。陰性對照的組成應為不含受檢物的正常血清或類似物。在用肉眼判斷結果時,更宜用顯色深于陰性對照作為標本陽性的指標。
    目視法簡捷明了,但頗具主觀性。在條件許可下,應該用比色計測定吸光值,這樣可以得到客觀的數據。先讀出標本(sample,S)、陽性對照(P)、和陰性對照(N)的吸光值,然后進行計算。計算方法有多種,大致可分為陽性判定值法和標本與陰性對照比值法兩類。
    a.陽性判定值 
    陽性判定值(cut-off value)一般為陰性對照A值加上一個特定的常數,以此作為判斷結果陽性或陰性的標準。
    用此法判斷結果要求實驗條件十分恒定,試劑的制備必須標準化,陽性和陰性的對照品應符合一定的規格,須配用精密的儀器,并嚴格按規定操作。陽性判定值公式中的常數是在這特定的系統中通過對大量標本的實驗檢測而得到的?,F舉某種檢測HBsAg的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對照品為不含HBsAg的復鈣人血漿,陽性對照品HBsAg的含量標明為P=9±2ng/ml。每次試驗設2個陽性對照和3個陰性對照。測得A值后,先計算陰性對照A值的平均數(NCX)和陽性對照A值的平均數(PCX),兩個平均數的差(P-N)必須大于一個特定的數值(例0.400),試驗才有效。3個陰性對照A值均應≥0.5×NCX,并≤1.5×NCX,如其中之一超出此范圍,則棄去,而已另兩個陰性對照重新計算NCX;如有兩個陰性對照A值超出以上范圍,則該次實驗無效。陽性判定值按下式計算:陽性判定值=NCX+0.05,標本A值>陽性判定值的為陽性,小于陽性判定值的為陰性。應注意的是,式中0.05為該試劑盒的常數,只適合于該特定條件下,而不是對各種試劑均可通用。
    根據以上敘述可以看出,在這種方法中陰性對照和陽性對照也起到試驗的質控作用,試劑變質和操作不當均會產生"試驗無效"的后果。
    b.標本/陰性對照比值 
    在實驗條件(包括試劑)較難保證恒定的情況下,這種判斷法較為合適。在得出標本(S)和陰性對照(N)的A值后,計算S/N值。也有寫作P/N的,這里的P不代表陽性(positive),而是病人(patient)的縮寫,不應誤解。為避免混淆,更宜用S/N表示。在早期的間接法ELISA中,有些作者定出S/N為陽性標準,現多為各種測定所沿用。實際上每一測定系統應該用實驗求出各自的S/N的閾值。更應注意的是,N所代表的陰性對照是不含受檢物質的人血清。有的試劑盒中所設陰性對照為不含蛋白質或蛋白質含量較底的緩沖液,以致反應后產生的本底可能較正常人血清的本底低得多。因此,這類試劑盒規,如N<0.05(或其他數值),則按0.05計算,否則將出現假陽性結果。
    (2)競爭法
    在競爭法ELISA中,陰性孔呈色深于陽性孔。陰性呈色的強度取決于反應中酶結合物的濃度和加入競爭抑制物的量,一般調節陰性對照的吸光度在1.0-1.5之間,此時反應zui為敏感。
    競爭法ELISA不易用自視判斷結果,因肉眼很難辨別弱陽性反應與陰性對照的顯色差異,一般均用比色計測定,讀出S、P和N的吸光值。計算方法主要也有兩種,即陽性判定值法和抑制率法。
    ELISA試劑盒
    a. 陽性判定值法
    與間接法和夾心法中的陽性判定值法基本相同,但在計算公式中引入陽性對照A值,現舉某種檢測抗HBc的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對照為不含抗HBc的復鈣人血漿,陽性對照中抗HBc含量為125±100u/ml。每次試驗設2個陽性對照和3個陰性對照。測得A值后,先計算陰性對照A值的平均值(NCX)和陽性對照A值的平均數(PCX),兩個平均數的差(N-P)必須大于一個特定的數值(例如0.300),試驗才有效。3個陰性對照A值均應小于2.000,而且應≥0.5×NCX并≤1.5×NCX,如其中之一超出此范圍,則棄去,而以另2個陰性對照重新計算×NCX;如有2個陰性對照A超出以上范圍,則該次實驗無效。陽性判定值按下式計算:陰性判定值=0.4×NCX+0.6×PCX,標本A值≤陽性判定值的反應為陽性,A>陽性判定值的反應為陰性。 
    b. 抑制率法 
    抑制率表示標本在競爭結合中標本對陰性反應顯色的抑制程度,按下式計算:
    抑制率(%)= (陰性對照A值-標本A值)×100%/陰性對照A值,一般規定抑制率≥50%為陽性,<50%為陰性。

產品中心 Products
在線客服 聯系方式

服務熱線

021-54479081
021-54461587

久久中文字幕无吗一二区| WXXX18性视频在线| 欧美 亚洲 精品 高清| 日日骚av一区二区三区| 自拍h在线观看| 欧美成人免费午夜福利视频| 日韩不卡一区二区三区色图| 99久久精品费精品国产一区二| 国产精品色午夜免费视频| 亚洲色成人四虎在线观看| 东京热国产精品一区二区| 欧美国产欧美在线免费观看| 日本欧美视频一区二区三区| 日本一区二区三区国产欧美| 国产乱码精品一区二区亚洲| 日本最新一区二区三区电影| 国产精品亚洲一区二区毛片| 天天操天天舔天天操天天舔| 欧美a片在线观看高清版| 欧美日韩一区二区aⅴ电影| 一道本免费在线免费视频| 啊啊啊嗯嗯不要视频在线| 97精品人妻一区二区三区香蕉 | 精品国产精品国产偷麻豆| 久久九九久精品国产免费直播| 久久久久人妻91久久久| 操骚屄成人免费在线视频| 国产精品久久久久9999| 久久久一区二区日韩精品| 少妇潮喷无码白浆水视频| 久久久中文字幕在线视频| 国产69精品久久久熟女| 九九九精品视频在线播放| 无码国产69精品久久久久网站| 精品日韩欧美一区二区三区| 国产成人a视频在线观看| 国产亚洲欧美综合在线区| 中文有码国产精品欧美激情| 2020久久精品亚洲综合| 国产一区二区三区四区久久| 国产精品亚洲第五区在线|